衣原体感染（Chlamydial Infection）
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衣原体感染能够引起许多疾患。其中对泌尿系统的感染常被称为非淋菌性尿道炎（nongonococcal urethritis，NGU。在非淋的病原体检测中，沙眼衣原体的发现率占到了40%-60%。
病理学
[病原体]
衣原体为革兰氏阴性病原体，是一种专性细胞内微生物，没有合成高能化合物ATP、GTP的能力，必须由宿主细胞提供，因而成为能量寄生物。衣原体是一类能通过细胞滤器，有独特发育周期、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。
衣原体具有以下特点：
(1)具有DNA和RNA两种类型的核酸；并以二等增殖法进行繁殖，发育周期特别。这与病毒不同。
(2)细胞壁成份中含有肽聚糖；衣原体内含有核蛋白体。
(3)与立克次体不同，除了不能合成高能化合物外，还在于没有细胞色素，没有呼吸性电子链的其他组分以及独特的发育周期。
(4)对多种抗生素都敏感。
衣原体的生长发育周期分两个阶段：原生小体(elementary body)，是发育周期的感染阶段，具感染力；网状小体(initial body)，是在感染细胞内的繁殖阶段，具增殖力。在电镜下可见胞膜呈有丝分裂繁殖。
原生小体先附着于易感细胞的表面，然后通过细胞的吞噬作用进入细胞内，形成网状小体在细胞内繁殖，以后形成包涵体，同时对组织产生炎症变化而引起一系列的临床症状。衣原体的全部生长发育约48小时（有的72小时），完成生长周期后，网状小体重新组织，在一对一的基础上缩合成原生小体，后者从空泡中释放再感染其他细胞。在整个约48小时的生长发育周期中，衣原体始终处于一个吞噬体中，直到细胞严重损伤和细胞死亡。原生小体在电镜下呈球形，直径200-300毫微米，DNA紧密连接并呈锥状电子密度。分子量6-11*105，明显小于细菌和立克次体，相当于支原体，是大的痘病毒的3-5倍。网状小体呈圆形或椭圆形。
衣原体是自然界中传播很广泛的病原体。衣原体广泛寄生于人类，哺乳动物及鸟类，仅少数有致病性。
衣原体属有两个种可以引起人类疾病：
沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)和鹦鹉热衣原体。后者引起禽类疾病，偶尔波及到人；前者引起人类疾病。两者具有共同的组抗原——脂多糖复合物。两者的区别是沙眼衣原体的包涵体中含有糖元，碘染色可以着色，并对磺胺敏感；而鹦鹉热衣原体的包涵体中不含有糖元，对磺胺不敏感。
通过微量免疫荧光法，沙眼衣原体又分为15个血清型。其中，A、B、Ba、C血清型是沙眼的病原体，主要引起眼疾患；L1、L2、L3血清型是性病性淋巴肉芽肿（第四性病）的病原体；D、E、F、G、H、I、J、K8血清型引起生殖系统感染和散发的结膜炎。除L1、L2、L3以外，其余毒力较低，易感染结膜组织，特别是柱状上皮细胞。
衣原体对热敏感，56℃-60℃仅能存活5-10分钟，在-70℃可保存数年。0.1%甲醛液、0.5%石碳酸可将衣原体在短期内杀死，75%乙醇杀灭力很强，半分钟即有效，对利福平、四环素、红霉素均敏感。
[发病机理]
衣原体感染人体后，首先侵入柱状上皮细胞并在细胞内生长繁殖，然后进入单核巨噬细胞系统的细胞内增殖。由于衣原体在细胞内繁殖，导致感染细胞死亡，同时尚能逃避宿主免疫防御功能，得到间歇性保护。衣原体的致病机理是抑制被感染细胞代谢，溶解破坏细胞并导致溶解酶释放，代谢产物的细胞毒作用，引起变态反应和自身免疫。
当人体感染衣原体后，产生特异性的免疫，但是这种免疫力较弱，持续时间短暂，因此，衣原体感染容易造成持续，反复感染，以及隐性感染。细胞免疫方面，大部分活动性已治愈的衣原体患者，给予相应的抗原皮内注射时，常引起迟发型变态反应。这种变态反应可用淋巴细胞进行被动转移。此种免疫性很可能是T细胞所介导。体液免疫方面，在衣原体感染后，在血清和局部分泌物中出现中和抗体。中和抗体可以阻止衣原体对宿主细胞的吸附，也能通过调理作用增强吞噬细胞的摄入。
流行病学
男性非淋菌性尿道炎最常见的病原菌是沙眼衣原体。在美国异性恋男性中沙眼衣原体阳性率达40%，每年约有60万男性患者呈持续性或复发性NGU，同时发现沙眼衣原体宫颈炎妇女其男性性伴侣的感染率为42%，患衣原体尿道炎的男性其女性性伴侣的感染率为62%，无症状的沙眼衣原体感染在性活跃的男人间传播率更高。
引起男性不孕症的因素很多，但最近发现从无生殖力的脓性精液及男子性腺活检标本中分离出沙眼衣原体，进一步提示和证明了沙眼衣原体引起男性不孕症的可能性。有人对淋病感染症的男性患者进行观察，发现体内有高效价的抗衣原体抗体，衣原体阴性淋菌尿道炎者亦有高价抗衣原体抗体，并发现65-85%的非淋菌性尿道炎是由沙眼衣原体引起。
附睾炎是男性NGU最主要的并发症，在年轻的性活跃的男性附睾炎患者中，45-60%是由沙眼衣原体引起。大多数病人有尿道症状或体征，尿道标本和附睾吸取液中可分离到衣原体。
沙眼衣原体性子宫颈炎在女性衣原体感染中最多。因为感染只发生于子宫颈的柱状上皮，而不感染阴道的鳞状上皮，故不造成阴道炎。英国去性病门诊就医的妇女衣原体培养阳性率为20-30%，微量免疫荧光法检测血清抗体达60%。淋病患者的宫颈炎标本衣原体阳性率为30-35%，伴不典型宫颈炎或无症状衣原体宫颈感染为3-5%，说明衣原体隐性感染率和混和型感染率相当高，对宫内避孕器的应用者进行测定，发现由避孕器引起的盆腔炎症中大部分是由衣原体感染所致。在男性NGU患者配偶的宫颈中有30-60%分离出衣原体。在与感染的男性性交后约33-49%的宫颈衣原体感染的阳性患者并不表现任何症状，但持续存在于宫颈基层上皮细胞内的衣原体抗原可干扰宿主细胞DNA使之发生恶变。
研究表明，在腹腔镜直视下采取受侵输卵管液检查中发现衣原体阳性率在30%左右、并发现，有40%左右的输卵管炎是由沙眼衣原体引起的，且衣原体感染的孕妇容易发生流产，而流产后多数又引起输卵管炎。许多临床衣原体感染的妇女数年后出现不孕或宫外孕、并发现输卵管梗阻所致宫外孕，宫外孕和生育力低下者中沙眼衣原体抗体阳性占81%。
沙眼衣原体的感染可引起男、女性急性尿路综合症，在发达国家，沙眼衣原体引起的女性尿道炎的趋势正在不断地增加，并且正在年轻化，应引起全社会的关注。
我国沙眼衣原体感染属于近年的事，由于临床上较多的泌尿生殖系感染查不出病因，故引起专家们对衣原体感染的临床研究。从1989年我国从14例性乱妇女宫颈标本中分离培养出沙眼衣原体以来，越来越多的研究表明在性活跃期的性乱及正常家庭中，沙眼衣原体的泌尿生殖道感染率在5-25%之间，特别是家庭成员之间的传播更应引起重视，不少儿童性NGU是由沙眼衣原体的感染引起的。
应该说明一点：当今有些所谓NGU与性行为并无关系，如医源性感染（尿道插管、膀胱镜以及外伤或化学性刺激等）。还有所谓NGU并非是由衣原体性微生物所致，在含义上应该与NGU加以区别，因为病原体不同，而传播途径也有所不同，故医生在诊治中要心中有数。
临床表现
[男性衣原体感染]
男性衣原体性尿道炎（chlamydia urethritis，CU）是由衣原体感染引起的非急性化脓性尿道粘膜炎性病变。目前已成为STDs中最常见的一种。
本病潜伏期比淋病长，约1-3周或数月，主要表现为尿道内不适，刺痛及烧灼感，并伴有不同程度的尿频、尿急、尿痛，尿痛较淋病为轻。尿道口轻度红肿并有浆液或粘液脓性分泌物，稀薄而量少，长时期不排尿或早晨首次排尿前可见尿道口分泌物污染内裤，并可见尿道口有“糊口”现象；分泌物少时，于晨起挤压尿道才流出少量粘液。合并膀胱炎时可有血尿；无症状性非淋菌性尿道炎，约30-40%病人症状不典型或根本无症状。约1/3左右的淋球菌尿道炎病人合并沙眼衣原体感染，淋病治愈后又出现尿道炎症状，易误诊为慢性淋病或PPNG菌株感染。
沙眼衣原体感染易并发附睾炎，表现为附睾肿大，变硬及触痛，多为单侧，部分患者的抗沙眼衣原体抗体升高，可直接从附睾抽吸液中分离出沙眼衣原体；累及睾丸可出现睾丸炎，表现为睾丸疼痛、触痛、阴囊水肿及输精管变硬变粗；累及前列腺时可出现后尿道、会阴及肛门部位钝痛或触痛，可有性功能障碍，直肠镜检可触及有压痛的前列腺。如前列腺明显肿大，可压迫后尿道而出现尿流变细、排尿无力及尿流中断等；本病还可以合并Reiter综合征，即关节炎，结膜炎，尿道炎三联症。
[女性衣原体感染]
女性生殖系统衣原体感染症
女性感染衣原体不限于尿道，可累及整个泌尿生殖器官，此类感染常因缺乏自觉症状或症状轻微而忽视了治疗，造成传染源而扩散，形成危害。
女性衣原体感染比男性感染引起的症侯要多，其主要感染部位为宫颈，由此垂直感染给新生儿，以至发生PID等，其后遗症多导致不孕症。
无症状感染（缺乏症状反应）：由于本病缺乏自觉症状，则局部病象便成为诊断的一个重要指标，表现为阴道有脓样分泌物，亦可为粘液或浆液性。分泌物量较多（为中等量），稍有臭味。阴道粘膜为正常颜色，但常伴有宫颈糜烂。
衣原体性宫颈炎：当伴发宫颈炎时、宫颈发红，有浆液或脓性分泌物增加、阴道内糜烂扩大，易于出血等症状。镜检下阴道分泌物的所谓“阴道清洁度”多为III度以上。沙眼衣原体主要侵犯宫颈的柱状上皮细胞，而磷状上皮细胞常不被侵犯，故阴道，宫颈局部没有改变。
宫颈炎的主要症状是白带增多，不时出血及小腹部疼痛等一般症状，无特异性表现，多因其性伴患有尿道炎而来院就诊。
衣原体性输卵管炎，本症多由宫颈炎并发引起。用腹腔镜直接从输卵管抽吸物标本中，约30%以上检测出衣原体，病情经过多数较轻、下腹部可有轻微疼痛，一般体温不高，但血沉稍快。由于这种非典型经过，使病人拖延就医，往往引起子宫附件损害，形成输卵管炎的后遗症，其最主要表现是输卵管性不孕症。
盆腔炎（PID）：PID不是固定疾患的用语，凡在盆腔内感染症，如宫内感染，输卵管炎等附件炎症波及盆腔腹膜特定的部位感染均可称之为PID，由CT引起的PID主要是由宫颈炎上行感染所致。其主要表现是急腹症型。
部分患者可导致宫外孕、流产、不孕、死胎及新生儿死亡。有些病人除不孕外，可无任何症状。也可通过产道传染，引起婴儿眼结膜炎、鼻炎、中耳炎、肺炎及阴道炎等。
诊断与鉴别诊断
实验室诊断
沙眼衣原体感染实验室诊断
诊断沙眼衣原体感染常用的实验室方法有以下几种：
①标本涂片染色直接镜检；
属于衣原体细胞学检查法。在感染细胞内可有衣原体的包涵体存在。从感染部位采取细胞标本作涂片，将临床标本涂片后，作姬姆萨染色、碘染色或帕氏染色，镜下观察。姬姆萨染色包涵体是蓝色或暗紫色，碘染色显示褐色。这是一种简便、价廉的诊断方法，可用于新生儿眼结膜刮片的检查，但它不适宜用于泌尿生殖道沙眼衣原体感染的诊断，因为在这种情况下，它的敏感性（40%）和特异性均极低。目前已较少采用。
②细胞培养法；
对沙眼衣原体敏感的细胞株为McCoy细胞、Hela-229细胞和BHK细胞，最常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞，孵育后，用单克隆荧光抗体染色，可迅速诊断，但操作人员一定要熟练，需专业培养。阳性即可确立诊断。
此法是目前检测沙眼衣原体感染最为敏感和特异的方法，在有经验的实验室，敏感性为70%～95%。此法可用作证实试验和治疗后的判愈试验。缺点是耗时、费钱，需一定的实验设备，不过大批量标本同时处理可降低成本。
作细胞培养取材很重要。对女性患者，一般取宫颈管标本，方法是先用一根长棉拭擦去宫颈表面粘液，弃去； 再用另一根长棉拭插入宫颈管1～2cm处，捻转数圈，停留10秒后取出送检。作沙眼衣原体检查时，拭子标本放入标本运送液中，负85℃低温冰箱保存待用。对于新生儿眼炎或肺炎，也可取结膜刮片标本及痰液、支气管洗出液等。
③抗原检测试验，包括直接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验；
也属于衣原体细胞学检查法。
直接免疫荧光法
近年来采用荧光素标记的抗衣原体单克隆抗体，来检测细胞涂片中的衣原体，使用较为方便。
针对沙眼衣原体主要外膜蛋白(Syva,Difco,Kallestad 的产品 )或脂多糖(Bartels,Boots Celltech,Califonia Integrated Diagnostic的产品)的单克隆抗体与相应的抗原结合，单克隆抗体标有荧光素，在荧光显微镜下，阳性者可见到亮苹果绿的原体和始体。此法诊断沙眼衣原体感染的敏感性为70%～90%，特异性为83%～99%。由于有可能将某些发光颗粒(白细胞、上皮细胞、色素颗粒)、细菌和酵母菌误认为沙眼衣原体，因此此法对于实验人员的技术水平要求较高。
直接免疫荧光法的优点是：快速，价廉，操作简便，标本的贮存和运送方便，标本中的沙眼衣原体不必是存活的或是有感染性的。由于已经有商品化的试剂盒供应，因而方便了使用。缺点是在低感染率的人群中敏感性差，受实验人员的主观影响大。它最适宜用来检测沙眼衣原体高流行率人群(如性病门诊病人)。
目前主要用衣原体外膜蛋白（MOMP）的单克隆抗体的商品试剂（Mico Trak，Pathfinder，Monofluor）。结果判断：要衣原体数>10个才能判为阳性。
酶联免疫吸附试验
将沙眼衣原体抗体致敏聚苯乙烯小珠 ( Chlamydiazyme，为Abbott的产品)或包被微量板孔(IDEIA,为 Boots Celltech 的产品；Pathfinder，为Kallestad的产品)，捕获标本中的沙眼衣原体抗原，通过酶联显色反应而判断结果。此法诊断沙眼衣原体感染的敏感性与直接免疫荧光法相当，而特异性稍有不如(90%左右)。试验结果阴性时，不能完全排除沙眼衣原体感染，有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集不当的缘故。
此法的一个显著优点是自动化程度高，可同时检测大批量标本，结果判断客观性强。它与直接免疫荧光法一样，最适宜用来检测沙眼衣原体高流行率人群。在低流行率的人群中应用时，解释结果宜慎重。
胶体金免疫扩散试验
在两块长方形塑板中衬有检测滤纸条，滤纸条上吸附有抗沙眼衣原体单克隆抗体。在塑板的“样本窗”加样，通过毛细作用，渗入“结果窗”，如为阳性则见细线形成。此法诊断女性宫颈沙眼衣原体感染的敏感性为87%，特异性为98.8%。此法的优点是简易，方便，快速，尤其适用于基层单位。缺点是标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原。目前厂家仅推荐用于诊断女性生殖道沙眼衣原体感染。
④DNA杂交及聚合酶链反应(PCR)法；
聚合酶链反应
这是一种体外扩增特异DNA片段的方法， 用于诊断沙眼衣原体感染的PCR法已有商品化试剂盒(Amplicor C. trachomatis test)。PCR法诊断泌尿生殖道沙眼衣原体感染的敏感性高,在细胞培养阴性者亦能检测出沙眼衣原体感染。在一项比较研究中,PCR、培养和Gen-Probe的敏感性分别是95%、86%和65%。有研究发现，PCR的特异性达到99％～100％。一种PCR(以质粒DNA顺序为引物)阳性而培养阴性的标本可以用另一种PCR(以不同的质粒DNA顺序或主要外膜蛋白基因顺序为引物)证实,说明可能并非是PCR假阳性结果。然而,也有报告由于“残留（carry over）”污染而造成PCR假阳性,或因标本中含有Taq酶抑制物质而使PCR假阴性。在PCR反应体系中加入内参照可以发现假阴性问题；此时可将标本以反复冻融几次或冻存较长时间或稀释等方法来解决之。临床上，PCR的结果应该结合病史和治疗情况进行分析,必要时重复取材或在另一部位取材作试验。以沙眼衣原体主要外膜蛋白基因顺序为引物，进行PCR扩增，扩增产物以限制性内切酶酶切，分析酶切产物，即PCR-RFLP，可用于对沙眼衣原体进行分型。此种基因学分型结果与血清学分型结果基本一致。
LCR法也已用来检测沙眼衣原体感染。如,以沙眼衣原体隐蔽性质粒顺序为引物,利用LCR法检测718份尿液标本的沙眼衣原体,并与细胞培养法相比较。两者结果不一致时,再用DFA和另一种LCR(以沙眼衣原体主要外膜蛋白基因顺序为引物)加以验证。这样,观察到LCR的敏感性和特异性分别为94.5%和99.5%;阳性预期值和阴性预期值分别是97.5%和98.8%,而细胞培养的敏感性只有57.1%。LCR与PCR法均能一致扩增沙眼衣原体的DNA数量达3个衣原体原体水平。
沙眼衣原体核酸扩增技术的另一进展是可用清晨首次尿（或禁尿4小时后的首次尿）作为标本。据报告，男性尿液标本以PCR或LCR作沙眼衣原体检测，敏感性为93.5％～100％，特异性为99.1％～100％，而尿道拭子培养的敏感性平均为68.2％。女性尿液标本以LCR检测沙眼衣原体的敏感性为95.7％，特异性为100％，而宫颈管拭子培养的敏感性为59.6％。由于尿液取材方便，对患者无侵害，因此这种方法适合于在不同人群中进行大规模筛查，也适合于边远地区标本采集后运送至中心实验室进行检测。
PCR实验在操作时，尤其要避免外界污染及残留污染，以免发生假阳性。PCR的开展需要一定的实验条件，实验人员需具备较为熟练的分子生物学操作技术。最好在实验条件较为成熟的实验室开展。
[PCR检测衣原体DNA操作技术]
（1）标本的处理：
① 取材部位为子宫颈管，男性为尿道，将灭菌白金耳深入宫颈管或尿道1cm左右，转动数圈，停留约30s，取出后置标本缓冲液中。
②衣原体DNA提取：
将宫颈管内或尿道内刮取物置含0.5% NP-40、0.5% Tween 20，1% SDS和2mg/ml 蛋白酶K的TES缓冲液（50mmol/L Tris-HCl，50mmol/L NaCl，100mmol/L EDTA，pH 8.0）置37℃裂解60min，沸水5min，酚、氯仿抽提DNA，乙醇沉淀 ，沉淀物溶于20?lTE缓冲液(100mmol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA，pH 8.0)。
（2）引物设计：
引物对选自衣原体16SrRNA基因，为衣原体属特异性，以DNA合成仪固相亚磷酸三酯合成并纯化。引物对的序列分别为5′GTGGATAGTCTCAACCCTAT 3′(16SrRNA基因位点832-851)和5′TATCTGTCCTTGCGGAAAAC3′(位点1041-1022)。目的扩增片段（832-1041）长210bp。
（3）PCR扩增：
传统的方法反应体积为100?l，含5x反应缓冲液20?l和FD-DNA聚合酶2U、4种dNTP各200?mol/L以及引物对各25pmol/L。上述成分预先一次性分装于0.5ml离心管，-20℃备用。临用加模板DNA 2?l，短暂离心，加100?l矿物油覆盖。现在试剂已商品化，反应体积为25?l，单管已分装好，只要加入模板DNA即可。置DNA扩增仪进行40次循环扩增。每次循环包括90℃变性45s(第一次循环变性2min)，55℃退火30s和72℃延伸40s（最后一次循环72℃，延伸5min）三个步骤。每次扩增均应作阴阳性对照。
（4）扩增产物的检测
① 1.5%琼脂糖凝胶电泳检测：取10u l PCR扩增物作1.5%琼脂糖凝胶电泳、0.5?g/ml溴化乙锭染色，以PGEM-3Zf（+）DNA-Hae Ⅲ为分子量标准，置紫外透射仪观察结果。
② 生物素寡核苷酸探针的检测
a.探针序列及合成：探针序列为5′ACTCAA-AAGAATTGACGGGGGCCCGCACAA 3′(30mer)GOPLA，衣原体16Sr RNA基因中的位点为909-938，与PCR扩增片段中间序列互补。以DNA合成仪固相亚磷酸三酯法合成并纯化。
b.标记：按Riely等方法略有修改。以末端脱氧核糖核酸转移酶（TdT）催化Bio-11-dUTP标记到合成的寡核苷酸探针片段3′-OH端。反应体系含：140mmol/L二甲胂酸钠，30mmol/L Tris-HCl（pH 7.6），100?mol/L Bio-11-dUTP，0.1?mol/L 寡核苷酸片段，0.05%BSA，300U/mlTdT。于37℃保温3h后，加10mmol/LEDTA终止。寡核苷酸片段探针标记后，将标记探针（1ng/?l）作2倍系列稀释，取5?l点膜,封闭后显色。结果探针经32倍稀释（最高稀释度5ng）后仍呈现明显的显色反应，证实探针的标记以及显色效应良好。
c.DNA斑点杂交：提取的DNA或其PCR扩增产物0.5mol/L NaOH变性20min，取5?l点于硝酸纤维素膜，烘干；以6×SSC(1xSSC为：0.15mol/L NaCl，0.015mol/L柠檬酸三钠，pH 7.0)浸泡2次，80℃干烤2h。置6×SSC，5×Denhardt液，0.2%SDS，50?g/ml变性牛胸腺DNA，10mmol/L EDTA中于55℃杂交3h后，加入终浓度为150?g/ml的探针，于55℃杂交过夜。以2×SSC-0.1%SDS室温漂洗3次，每次15min。
d.显色：将杂交漂洗后的滤膜浸泡于0.1mol/L Tris-HCl (pH 7.5)，0.15mo l/L NaCl，0.05%Tween20，0.05%%TritonX-100，2%BSA中，37℃封闭6min；置4?g/ml亲和素的缓冲液A（0.1mol/L Tris-HCl，0.15mol/L NaCl，pH 7.5）中，37℃孵育30min，缓冲液A漂洗3次；再置于含1?g/ml生物素化碱性磷酸酶的缓冲液A中，37℃作用30min，缓冲液A漂洗2次，缓冲液B（0.1mol/L Tris-HCl，0.1 mol/L NaCl，50 mmol /L MgCl2，pH 9.5）漂洗2次。最后将膜泡于含0.1mg/ ml磷酸萘酚AS-MX和0.6mg/ml坚固蓝RR的缓冲液B中，暗处显色30min。
PCR扩增衣原体DNA有十分高的特异性及敏感性，结合生物素标记的衣原体寡核苷酸探针作DNA斑点杂交。可作为衣原体诊断的金标准，其敏感度可以检测相当于1个拷贝的衣原体DNA分子。
⑤血清抗体检测；
尽管沙眼衣原体感染时血清和泌尿生殖道分泌液中会出现抗体，但血清学试验对于诊断无并发症的泌尿生殖道感染价值不大。免疫反应为期短暂，且再感染常有发生。血清抗体在性病高危人群中有较高的本底检出率。不过，在性病性淋巴肉芽肿(LGV)和沙眼衣原体性附睾炎、输卵管炎时血清抗体水平明显升高，检测血清抗体水平有助于诊断。新生儿衣原体肺炎也可用血清学方法测定抗衣原体IgM抗体，具有诊断价值。方法有酶联免疫吸附试验和微量免疫荧光法，后者的操作较繁琐，不过，目前已有简化的L2抗原免疫荧光试验。Orgenics的Immunocomb和Bio Merieux的MicroEIA均是酶联免疫吸附法，所不同的是前者是将抗原包被于塑料梳齿上，后者则是包被于微量板孔中。当抗体滴度达一定水平( 如女性≥1：128，男性≥1：64)时，提示有并发症(附睾炎或输卵管炎)，或为LGV。 由于沙眼衣原体感染后血清阳转需2～3周时间，因此抗沙眼衣原体IgG检测阴性不能完全排除感染。 而病人即便经治疗后，IgG升高仍能持续较长时间，故阳性结果也不一定证明有感染存在。
诊断衣原体性疾患，目前在我国尚未普及，因此，往往漏诊，所以应当重视临床表现，争取做到化验室检测指标求得确诊。
检测出病原体或病原体特异性DNA是诊断本病唯一标准，近年来由于对CT直接分离培养成功，加之基因诊断技术在CT诊断方面的成功应用，使过去认为难以诊断的疾患已提高到最易诊断的一种疾患，但是上述两项技术特殊，对操作人员及实验设备要求严格，在一般医院实行起来尚难完成。一般只用CT抗原法进行诊断。
衣原体治疗
衣原体对作用于细胞壁的药物耐药，如青霉素类、万古霉素、杆菌肽，对于抑制膜蛋白和胞浆蛋白合成药物敏感，如四环素、红霉素等。
治疗方案
首先四环素类，四环素500mg每日4次，连服7天，或用强力霉素100mg每日2次，连服7日。对四环素禁用或耐受性差的患者，可改服红霉素500mg，每日4次，连服7日，复方新诺明亦有效。
另外近年来新开发的对各领域的感染症广泛使用的新药喹诺酮类，在治疗衣原体方面临床效果较好，其中常用的药物有氧氟沙星（OFIX），环丙沙星（CPFX），洛美沙星，利福平治疗效果也较好。
治疗中应注意的问题：
（2）从目前临床观察来看用喹诺酮类药物比应用四环素类药物为好，因为患者多数有淋球菌或其它合并感染。
（3）治疗时间2-3周为宜。衣原体繁殖周期为48-72小时，寄生在细胞内，药物渗入细胞内的浓度一般较低。所以治疗时间需要长些。
（4）在男女感染后无症状或症状轻微者，可视为带菌者，应接受正规治疗。对患者的性伴要同时治疗。
（5）联合用药：四环素类+喹诺酮类
红霉素类+喹诺酮类
四环素类+利福平
喹诺酮类+利福平
中医治疗请参考：非淋菌性尿道炎。